КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ

^ Полный АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ С Неуввязками ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ И ЛАЗЕРНОЙ ТЕРАПИИ А.А.Красновский1), А.С.Козлов1), О.Б.Любитский2), А.Н.Осипов2)

1)Институт биохимии им. А.Н.Баха РАН КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ; 2) ГОУ ВПО Русский муниципальный мед институт Росздрава


Понятно, что фотодинами­ческая терапия (ФДТ) определя­ется синглетным кислородом (СК) и свободными радикалами, которые генерируются приемущественно триплетными молекулами красите-лей, возникающими при поглощении красителями КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ световой энер­гии. Более действенным способом скрининга фотосенсибили-зирующей активности красителей является определение квантового выхода фотосен­­сибилизированного образования СК, так как этот процесс прямо показывает на фотохимическую активность триплет-ных состояний, кото КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ­рая определяется сочетанием 3-х причин – временем жизни, квантовым выходом и эффективностью взаимо-действия с кислородом. Молекулярный кислород проявляет фотохимическую активность также при прямом лазерном возбуждении. За отчетный период нами усовершенствован комплекс способов КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ регистрации СК при фотосенсибилизирован­ном и прямом возбуждении молекул кислорода в органических и аква средах в гомоген­ных и гетерогенных средах. В комплекс заходит измерение фотосенсибилизиро­ван­ной красителями соб­ствен­ной КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ ин­­­­фра­­­­крас­ной (1270 нм) фосфо­ресценции СК при помощи собранного в лабора­тории наносекундного лазерного импульсного спектро­метра, также несколько способов, основанных на применении ловушек СК, посреди которых более информативны КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ 1,3-дифенилизобензо­фу­ран (ДФИБФ), мочевая кислота (МК) и темпидон. Об образо­ва­нии СК судили по падению оптической плотности ДФИБФ либо МК. В случае темпидона при реак­ции с СК обра­­зуется размеренный КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ радикал ТЕМПО, который регистрировали ЭПР спек­тро­метром. Освоенный комплекс позволяет рассматривать системы хоть какой трудности. Работа развивалась по двум направ-лениям: (1) оптимизация разработанных способов и детализированный кинетический анализ реакций, лежащих в КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ их базе; (2) применение разработанных способов к исследованию систем, принципиальных для задач фотомедицины. Более принципиальные результаты состоят в последующем. Показано, что, хотя способ, основанный на измерении своей фосфоресценции кислорода, более информативен, он на КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ три порядка наименее чувствителен, чем способ, основанный на примене-нии ДФИБФ, потому для фосфоресцентного анализа требуется на три порядка более высочайшая энергия лазерного возбуждения. Разработана новенькая усовершенствованная методика внедрения ДФИБФ к анализу СК КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ, не требующая учета константы быстроты реакции. Установлено, что темпидон тушит СК в главном на физическом уровне, а выход радикала ТЕМПО составляет ~10-3. Потому темпидон малочувствителен и его имеет смысл использовать только в тех случаях КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ, когда спектрофотометрические измерения невозможны. Оптимизи-рованные способы использованы к исследованию образования СК при прямом лазерном возбуждении кислорода. Определены молярные коэффициенты поглощения кислорода в аква и органических средах в естественных КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ критериях, которые позволяют количественно оценивать скорость образования СК в тканях при ИК лазерной терапии. Вместе с ГНЦ НИОПИК определена фотосенсибилизи-рующая активность аква суспензий синтетических фталоциа-нинов, ковалентно связанных с силикагелем, синтезированных с КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ целью внедрения для фотообеззараживания воды и био жидкостей (плазмы, сыворотки крови). Вместе с Столичной гос академией узкой хим технологии им. М.В.Ломоносова проведен скрининг фотодинамической активности конъюгатов хлорина с бис-дикарболлидом кобальта КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ, применимых для бор-нейтронозахватной (БНЗТ) терапии рака. Показано, что ряд конъюгатов можно использовать сразу для ФДТ. Данные представлены на нескольких научных конференциях и в научной повторяющейся печати.


^ НОВЫЕ СПЕКТРАЛЬНО-ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ Способы ДИАГНОСТИКИ КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ ЭКСТРАЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ ДНК В ПЛАЗМЕ КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С Заболеваниями ОРГАНОВ КРОВООБРАЩЕНИЯ В.А.Кузьмин1), О.А.Рогинко2), А.И.Алехин2), А.А.Юдин2), Н.Н.Вейко3), Е.С.Лисицына1), Н.А.Дурандин1), Л КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ.В.Литвинкова1), А.М.Виноградов1), В.А.Волнухин1), А.В.Шибаева1)

1) Институт биохимической физики им. Н.М.Эмануэля РАН, Москва

2) Центральная клиническая поликлиника РАН, Москва

3)Медико-генетический научный центр, РАМН, Москва


Высочайшая концентрация экстрацеллюлярной ДНК в КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ крови пациентов с заболеваниями органов кровообращения (ишемическая болезнь сердца, острый инфаркт миокарда) обоснована нарушением клеточного апоптоза. В крови пациентов возникают большие куски ДНК, из которых потом в итоге межнуклеосомной деградации формируются КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ более маленькие куски ДНК. Высочайшая концентрация экстрацеллюлярной ДНК в крови нездоровых свидетельствует о тяжести заболевания и отражает степень повреждения органа при ишемическом повреждение ткани. В проекте разрабатываются новые флуоресцентные способы определения внеклеточной КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ ДНК в сыворотке крови нездоровых с болезнями органов кровообращения и инсталлируются корреляции с разными биохимическими параметрами для использования этих данных в медицинской практике.

Решение задачки отбора новых флуорофоров, специфичных к последовательностям, обогащенным КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ АТ- либо GC-парами, для детектирования внеклеточной ДНК проведено спектрально-кинетическими способами – флуоресцентная и абсорбционная спектроскопия, импульсный фотолиз, способ однофотонного счета для определения времен жизни синглетно-возбужденных комплексов краситель–ДНК. Для анализа экстрацеллюлярной КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ ДНК были применены комплексы, содержащие молекулы 2-ух либо 3-х различных красителей, обеспечивающих индуктивно-резонансный перенос энергии. Перенос энергии меж 2-мя красителями в комплексах с АТ- и GC-богатыми веб-сайтами снутри одной КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ молекулы ДНК позволяет выявить абсолютные концентрации разных теломерных повторов в нуклеиновых кислотах. Повышение содержания GC-ДНК в составе вкДНК является неплохим маркером развития в организме сокрытой патологии, сопровождающейся интен­сификацией КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ процесса смерти клеток. В составе вкДНК по сопоставлению с яДНК содержание ТОрДНК при патологии (ишемическая болезнь сердца у пенсионеров) выше в 10 раз.

При исследовании сыворотки 40 нездоровых острым инфарктом (ОИМ) было установлено КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ, что концентрация вкДНК увеличена в пару раз по сопоставлению со бодрствующими донорами и нездоровыми приобретенной формой ИБС. Увеличение количества вкДНК наблюдается исключительно в сыворотке нездоровых ОИМ, когда в маленький срок происходит смерть КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ огромного числа клеток организма. Концентрация маркера GC-ДНК (рибосомного повтора, ТОрДНК) в крови здоровых людей варьирует от 0,2 до 1,2 нг/мл сыворотки. У нездоровых ИБС концентрация ТОрДНК в крови увеличивается. В особенности высочайшие количества ТОрДНК КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ (7–10 нг/мл) детектируются в сыворотке нездоровых ОИМ.

Общее содержание антител значительно выше в сыворотке нездоровых ИБС, чем в сыворотке здоровых доноров. В комплексе с вкДНК нездоровых ИБС находится ~ 60 % антител, вырабатываемых КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ против суммарной ДНК, и ~ 70 % антител против фрагментов оксиДНК.

Приобретенные данные позволили установить, что характеристики вкДНК при сердечно-сосудистых заболеваниях существенно изменены и коррелируют с тяжестью патологии. Таким макаром, вкДНК и системы ее КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПОРФИРИНОВ И КИСЛОРОДА В СВЯЗИ элиминации – это новые потенциальные цели терапии при сердечно-сосудистой патологии.




kompleksnij-chertezh-tochki-ili-epyur-monzha.html
kompleksnij-gradostroitelnij-analiz-territorii-municipalnogo-obrazovaniya-omutninskoe-gorodskoe-poselenie.html
kompleksnij-investicionnij-plan-modernizacii-monoprofilnogo-municipalnogo-obrazovaniya-gorod-kameshkovo-vladimirskoj-oblasti-2012-god.html